根據實(shí)驗要求制備樣品完畢后。即可進(jìn)行觀(guān)察?;静襟E如下:
(1)開(kāi)啟儀器電源及光源:一般先開(kāi)啟顯微鏡和激光器,再啟動(dòng)計算機,然后啟動(dòng)操作軟件,設置熒光樣品的激發(fā)光波長(cháng),選擇相應的濾光鏡組塊。以便光電倍增管(photomultipliertube,PMT)檢測器能得到足夠的信號結果。使用汞燈的注意事項同普通熒光顯微鏡。
(2)設置相應的掃描方式:在目視模式下.調整所用物鏡放大倍數,在熒光顯微鏡下找到需要檢測的細胞。切換到掃描模式,調整雙孔針和激光強度參數,即可得到清晰的共聚焦圖像。
(3)獲取圖像:選擇合適的圖像分辨率,將樣品完整掃描后,保存圖像結果即可。
(4)關(guān)閉儀器:儀器測定樣品結束后,先關(guān)閉激光器部分,計算機仍可繼續進(jìn)行圖像和數據處理。若要退出整個(gè)激光掃描共聚焦顯微鏡系統.則應該在激光器關(guān)閉后,待其冷卻至少10分鐘后再關(guān)閉計算機及總開(kāi)關(guān)。
聚焦離子束顯微鏡的操作注意事項及維護保養:
(1)儀器周?chē)h離電磁輻射源;
(2)環(huán)境無(wú)震動(dòng),無(wú)強烈的空氣擾動(dòng);
(3)室內具有遮光系統,保證熒光樣品不會(huì )被外源光漂白;
(4)環(huán)境清潔;
(5)控制工作溫度在5~25℃。